Por Diogo Silva, Plastlabor

Padronizar ou quantificar inóculos bacterianos, é uma demanda muito usual em laboratórios de microbiologia. O analista tem a necessidade de saber a concentração de bactérias na qual ele irá semear ou inocular nas amostras testes, ou seja, tem a necessidade de padronizar concentração do inóculo, para que se obtenha um resultado esperado.

Esta etapa é necessária em validações de metodologias de análises microbiológicas, em testes de promoção de crescimento para avaliar a qualidade de meios de cultura, teste de susceptibilidade bacteriana, teste de eficácia de conservantes, saneantes dentre outras análises.

O processo para obter concentrações conhecidas pode ser realizado através do método turbidimétrico seguida da realização de diluição seriada.

Neste método é utilizado um tubo da escala Mc Farland 0,5 como padrão de turbidez (corresponde aproximadamente a uma suspensão homogênea de 1,5×10⁸ UFC/mL de Escherichia coli) para comparar com turbidez de um tubo de salina que será padronizado com a cepa inoculada.

O preparo tem início com uma placa previamente semeada, quando algumas colônias são transferidas para um tubo de solução salina estéril até que fique turvo semelhante ao tubo da escala Mc Farland 0,5, significando que a concentração no tubo de salina é 1,5×10⁸ UFC/mL.

Depois deste processo é possível seguir com a diluição seriada até a concentração de células do interesse do profissional que estará realizando o procedimento.

No vídeo abaixo é possível acompanhar o processo de diluição em série.

Diogo Silva é Supervisor do Controle da Qualidade